可重复性、可持续性和资源都是目前非常重要的议程,对实验室科学家来说比以往任何时候都重要。对于从事RNA工作的人来说,现在能否有一些解决这些问题的办法?
研究小组利用放置在不同位置的多组96孔板,放置一天后,观察到有些井会完全没有RNase污染,而有些井会完全被污染。他们的结论是,这完全是零星的,没有依赖性。
"我们期望它像冬日里的积雪一样--稳定而持续。但相反,它可能是突如其来、出乎意料和灾难性的。它不容易被定义。你可能在设备放置一小时内没有污染,也可能在打开无菌包装的那一刻就被污染了。"Phoseon Technology的应用科学家Theresa Thompson解释道。
因此,可以很容易地得出结论,RNase污染将如何导致更多的浪费、时间损失和可重复性问题。如果考虑到社会、政治和可持续性,这三个问题都是非常及时的问题。
与Tris缓冲器一起工作
在RNA研究的任何路径中;如果样品有任何降解,结果可能是不一致的,不准确的,很难得到的。虽然RNase对失活的抵抗力非常强,但通常的RNase去污途径包括用DEPC处理过夜和高压灭菌,这非常耗时。
许多实验都是在三聚氰胺缓冲液中进行的。这些缓冲液不能采用同样的去污方法,因为DEPC会攻击Tris的氨基基团,限制其缓冲能力,并在此过程中破坏其本身,使其无法灭活任何污染性RNase。
Phoseon科技公司发现,280纳米的紫外线波长可以靶向RNase A,使其不可逆地失活,而且对Tris缓冲液的pH值和缓冲能力没有影响。此后,Phoseon将这一技术融入到他们自己的新型技术平台KeyPro™中,该平台由高强度的LED灯组成,可以达到其他光源无法达到的强度。
在运行任何实验之前,立即开启该平台,在不到5分钟的时间里,包括Tris缓冲液在内的所有设备都会被RNase彻底净化。这个平台如何让研究人员受益,可以从更大的范围内引出当前科学家的关键问题。
可重复性
可重复性危机是生命科学领域目前正在发生的危机,其中许多实验方法无法重复。实验的可重复性是科学方法的一个重要组成部分,因为后继的研究和假设都是建立在公平但错误的假设之上的,即这些不可重复的研究可以重复。
我们现在知道,RNase污染是随机的。虽然96孔板中的一些孔可能完全不含RNase,但有些孔也可能完全被污染。
"该平台与高压灭菌器不同--它是一个固态照明系统,通过校准来确保始终输送相同的光量。甚至随着二极管本身的老化,单个二极管的输出量减少;系统每次运行时都会进行补偿。Phoseon Technology的高级产品经理Jay Pasquantonio评论道:"你今天运行的相同协议,5年后也会给你同样的输出。
该灯确保了板上所有96个孔的去污效果相同,因此无需担心基于特定孔中RNase存在的不同结果。公众对科学家的不信任感达到了前所未有的高度,重现性危机使理论失效,假新闻泛滥。因此,任何重现性的保证都会带来安慰。
资源简介
目前,科研经费是许多学校、学院和大学关注的问题。不稳定的政治环境导致了成本削减和更谨慎的资金规划。购买不含RNase的三聚氰胺缓冲剂价格昂贵,而且有可能造成浪费和不可持续。
时间作为一种资源也越来越紧张。随着人们工作时间的增加,时间确实是至关重要的。KeyPro只需要不到5分钟的时间,就可以对RNase的Tris缓冲液进行去污,并做好使用准备。之后可以立即进行实验。这与传统的去污方法相比,节省了大量的时间。
与传统的污染方法相比,使用KeyPro可以节省时间的演示。
此外,一旦发生RNase污染,可能一暴露在空气中,就需要不考虑实验,重新完成净化过程,这意味着研究人员可能会发现自己不必要地浪费巨大的时间段。
可持续发展
使用KeyPro系统不仅有可能限制一次性塑料废物,还可以限制反应剂、缓冲剂和产品废物的数量,而这些废物的成本也相当高。如果在使用前立即对缓冲剂进行去污,则可立即取用少量缓冲剂,因此可将废物量保持在较低水平,因为不需要处理任何潜在的污染溶液,也没有不必要的过剩。
总而言之,KeyPro 征服了与生命科学家息息相关的问题,所有这些问题结合在一起,让生活变得更加轻松。无论是节省可以更好地与家人或朋友相处的去污时间,还是节省可以更好地用于其他关键资源的资金,或者是限制个人研究中产生的废物数量,都有助于确保更可持续的未来。
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